核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸提取工作的儀器。廣泛應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。
分類(lèi):
一.根據儀器型號大小不同劃分
1、自動(dòng)液體工作站
自動(dòng)液體工作站是功能非常強大的設備,液體分液、吸液等自動(dòng)完成,甚至能通過(guò)整合擴增、檢測等功能,實(shí)現標本提取、擴增、檢測全自動(dòng)化。提取核酸只是其功能的一個(gè)應用,不太適合常規實(shí)驗室提取核酸,一般都應用在單一類(lèi)標本并且一次提取標本量非常大(至少96個(gè),一般幾百個(gè)、的實(shí)驗需求上。自動(dòng)工作站的平臺建立及平臺的運作,需要比較大的資金。
2、小型自動(dòng)核酸提取儀
小型的自動(dòng)化儀器是通過(guò)運行結構的特殊性來(lái)達到自動(dòng)提取核酸的目的,可以在任何實(shí)驗室得到應用。
二.根據提取原理不同劃分
1、采用離心柱法的儀器
離心柱法核酸提取儀主要采用離心機和自動(dòng)移液裝置相結合的方法,通量一般在1-12個(gè)樣本,操作時(shí)間和手工提取差不多,并不能提高實(shí)際工作效率,且價(jià)格昂貴,不同型號儀器的耗材也不能通用,僅適合經(jīng)費充足的大型實(shí)驗室使用。
2、采用磁珠法的儀器
以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過(guò)移動(dòng)磁珠或轉移液體來(lái)實(shí)現核酸的整個(gè)提取純化過(guò)程。由于其原理的*性,所以可設計成很多種通量,既可以單管提取,也可以提取8-96個(gè)樣本,且其操作簡(jiǎn)單快捷,提取96個(gè)樣本僅需30-45min,大大提高了實(shí)驗效率,且成本低廉,因而可以在不同實(shí)驗室使用,是目前市場(chǎng)上的主流儀器。
磁珠法核酸提取儀的基本原理
磁珠法核酸提取儀一般分為抽吸法和磁棒法兩種:
一.抽吸法,也叫移液法,是通過(guò)固定磁珠、轉移液體來(lái)實(shí)現核酸的提取,一般通過(guò)操作系統控制機械臂來(lái)實(shí)現轉移。提取過(guò)程如下:
1、裂解:在樣品中加入裂解液,通過(guò)機械運動(dòng)及加熱實(shí)現反應液的混勻及充分反應,細胞裂解,釋放核酸。
2、吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點(diǎn),吸附核酸,在外加磁場(chǎng)作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。
3、洗滌:撤去外加磁場(chǎng),換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質(zhì),在外加磁場(chǎng)作用下,將液體移出。
4、洗脫:撤去外加磁場(chǎng),換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。
二.磁棒法
磁棒法是通過(guò)固定液體,轉移磁珠來(lái)實(shí)現核酸的分離,原理和過(guò)程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過(guò)磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開(kāi),放入下一步的液體中,實(shí)現核酸的提取。