組織研磨均質(zhì)儀是實(shí)驗室樣品制備常用工具，它通過(guò)碳化鎢小球或不銹鋼小珠在樣品管內來(lái)回震蕩實(shí)現樣本的粉碎、混合、均化以及細胞破碎等，可以對硬性、軟性、彈性等樣品進(jìn)行快速的粉碎和均相化處理，符合理化分析實(shí)驗室的要求，配置不同體積、不同材料的研磨罐，可以進(jìn)行干磨、濕磨及冷凍研磨，也可以進(jìn)行細胞破碎和DNA/RNA提取，在農業(yè)、生物醫藥、食品、質(zhì)檢、高校等各行各業(yè)都有廣泛的應用。

 

　　組織研磨均質(zhì)儀是實(shí)驗室常見(jiàn)的儀器，很多實(shí)驗人員知道組織研磨均質(zhì)儀可以用來(lái)研磨組織用來(lái)提取DNA，但是具體的實(shí)驗步驟卻摸不清頭腦，今天我就拿研磨儀通過(guò)小鼠皮膚提取DNA來(lái)做個(gè)示范，不懂實(shí)驗步驟的要拿筆好好記一下了。

 

　　實(shí)驗步驟：

 

　　1、在2ml圓底離心管單管放入小鼠皮膚樣品40-50mg；

 

　　2、在離心管中加入5mm硬質(zhì)不銹鋼研磨珠1顆，蓋好管蓋，裝入鼎昊源TL1000自動(dòng)研磨儀適配器中；

 

　　3、將裝有樣品的適配器浸入液氮中；

 

　　4、待液氮不沸騰后取出，迅速安裝上機，采用間歇研磨方法；

 

　　5、間歇研磨參數設置為轉速2000rpm，每次自動(dòng)研磨1分鐘，間歇10s，循環(huán)4-5次效果好，從膠圖看RNA濃度較高；

 

　　6、研磨結束后，將離心管取出，每管加入裂解液（Trizol）0.5ml，之后進(jìn)行離心、純化等，做后續RNA提取實(shí)驗。

 

　　根據我的試驗經(jīng)驗，使用研磨儀研磨小鼠皮膚，參數設置轉速大于1600rpm，其他設置均采用以上案例中設定不變，都可以成功研磨并提取RNA。不過(guò)采用案例中的方法自動(dòng)研磨效果好。